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文 | 華中農業(yè)大學 陳昌福;武漢科研時代生物技術有限公司 周鑫軍 王曉娟 陸珍珠

草魚患細菌性敗血癥的癥狀,主要特征是身體發(fā)黑,、部分鱗片松動、脫落,,鰭條基部有出血現(xiàn)象,,部分病魚的肛門紅腫,鰓上有大量黏液并且附有污泥,,出現(xiàn)狂游,、亂竄等現(xiàn)象。解剖病魚檢查,,可見腹腔內有腹水,,腸道內少有食物,腸道發(fā)紅,、腸道內有充氣的現(xiàn)象,。


對于養(yǎng)殖草魚(Ctenopharyngodon idella)的細菌性敗血癥(bacterial septicemia),抗生素類“國標漁藥”的治療效果越來越差,。在我國不同的水產養(yǎng)殖區(qū)均屬于能引起嚴重經濟損失的魚類病害,。二氧化氯作為這款水產常用消毒劑,對殺菌有很好的效果,。那么如何控制制劑濃度與活化時間,,殺菌才最有效?




二氧化氯制劑的濃度與活化時間對殺菌效果的影響 ▏二氧化氯試驗④



摘要:本試驗通過檢測對嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)的殺菌效果,,評價了二氧化氯(ClO2)制劑配制濃度與活化時間對殺菌效果的影響,。本實驗結果證明,,四川齊力綠源水處理科技有限公司生產的ClO2制劑,將配制濃度控制在8000.0mg/L,、活化時間10min的條件下,,制備的ClO2制劑溶液,對A hydrophila顯示出了最強的殺菌效果,。


關鍵詞:二氧化氯制劑,;活化方法;致病菌,;殺菌效果


為了驗證四川齊力綠源水處理科技有限公司制備的二氧化氯(ClO2)制劑的活化濃度與時間對殺菌效果的影響,,特進行本試驗。


01
材料與方法


1.1供試藥物


四川齊力綠源水處理科技有限公司生產的ClO2制劑(批準文號:川衛(wèi)消證字2019第0001號,、生產日期20220416)作為本試驗中的供試藥物。


1.2供試菌株及其培養(yǎng)


從患細菌性敗血癥的草魚(Ctenopharyngodon idella)體內,,分離到的致病性嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)菌株作本試驗的供試菌株,。將冷凍保存菌株接種在腦心浸液瓊脂培養(yǎng)基(BHIA,Difco)上,,28℃培養(yǎng)24 h,,以滅菌生理鹽水洗下菌苔,離心集菌,,并用滅菌生理鹽水將濃度調節(jié)為1×107cfu/mL,,低溫保存?zhèn)溆谩?/span>


1.3ClO2制劑的配制方法


在配制ClO2制劑溶液前打開包裝袋,從同一個包裝袋中準確稱取ClO2制劑若干,,分別溶解于3個盛有100.0mL蒸餾水的玻璃燒杯中,,輕輕攪動使ClO2制劑充分溶解,制備成終濃度為2000.0mg/L,、4000.0mg/L和8000.0mg/L的3個不同濃度的ClO2制劑供試原液,。


ClO2制劑加入蒸餾水中開始計時,于活化10min,、20min和30min后,,分別從不同濃度的ClO2制劑供試原液中,定量取樣做殺菌試驗,。

1.4 殺菌處理


從位于武漢市新洲區(qū)汪集鎮(zhèn)的孟斌魚苗孵化場蓄水池取水(圖1),。將取回的池水在每個容量為250.0mL的三角玻璃燒杯中,分別盛裝100.0mL的滅菌池塘水(圖2),。

圖1示從水產養(yǎng)殖場蓄水池中養(yǎng)殖池水的情景

圖2示將養(yǎng)殖池塘水定量分裝在三角玻璃燒杯中的情景

經過高壓滅菌后(圖3),,將其移出高壓滅菌鍋并置于超凈工作臺上(圖4),在無菌條件下,,向每個三角玻璃燒瓶中添加1.0 mL菌濃度約為1×107cfu/mL的A.hydrophila活菌液(圖5),,輕輕搖動三角玻璃燒瓶,,使菌液在三角玻璃燒杯瓶中分布均勻。

圖3示將養(yǎng)殖池水經過高壓滅菌的情景

圖4示將滅菌后的三角玻璃燒瓶中置于超凈工作臺中的情景

分別從不同濃度的ClO2制劑原液中定時,、定量取樣,,添加在盛有100.0mL滅菌池塘水的三角玻璃燒瓶中,使水體中的ClO2制劑的終濃度分別達到0.10mg/L,,0.30mg/L,,0.60mg/L和0.90mg/L。輕搖動添加ClO2制劑原液后的三角玻璃燒瓶,,使菌體和藥液均勻地分布在水中,。另外設置添加菌液但不添加ClO2制劑原液的三角燒瓶作為對照組。添加藥液結束40 min后,,檢測不同濃度ClO2制劑的殺菌效果,。


圖5示向盛有滅菌池水的三角玻璃燒杯中定量添加致病菌的情景


1.5 殺菌效果的檢測


在無菌條件下,從各三角玻璃燒瓶中取0.10mL水,,塗抹在用BHIA制備的平板上,,在28℃條件下培養(yǎng)48 h后,通過計數(shù)各平皿中的菌落數(shù)量,,根據(jù)菌落的生成狀況,,判斷ClO2制劑的殺菌菌效果。


02
結果


采用不同的濃度與活化時間制備的ClO2制劑溶液,,對A.hydrophila殺菌效果的影響見圖6,。由圖6所示結果可以看出,在配制ClO2制劑溶液時,,濃度與活化時間均對配制ClO2制劑溶液的殺菌效果有影響的,。在本試驗中,在ClO2制劑溶液起始濃度為8000.0mg/L以內,,配制濃度越大,,殺菌效果越好。而將ClO2制劑添加在水體中后的活化時間,,在這次試驗中控制的3個活化時間,,以將活化時間控制在10min的ClO2制劑溶液殺菌效果最好。


圖6 配制ClO2制劑的濃度與活化時間對殺菌效果的影響


03
討論


眾所周知,,ClO2是一種黃綠色到橙黃色的氣體,,是國際上公認為安全、無毒的綠色消毒劑,。ClO2常態(tài)為氣態(tài),,沸點11℃。當濃度很高時呈紅黃色,低濃度時呈黃綠色,,是一種具有強烈刺激性臭味的氣體,,有類似氯氣和硝酸的特殊刺激臭味。在-59℃時凝固成橙紅色晶體,。


ClO2能與許多化學物質發(fā)生爆炸性反應,。尤其是對熱、震動,、撞擊和摩擦相當敏感,,極易分解發(fā)生爆炸。受熱和受光照或遇有機物等能促進氧化作用的物質時,,能促進分解并易引起爆炸,。氣相濃度超過10%則會發(fā)生爆炸,若用空氣,、二氧化碳,、氮氣等惰性氣體稀釋時,爆炸性則會有所降低,。正是因為ClO2具有這些特點,,自人類發(fā)現(xiàn)ClO2后的較長時間內,并沒有將其作為商品開發(fā)應用,。而之所以沒有作為商品開發(fā)應用,主要是因為ClO2不能作為直接運輸?shù)纳唐?,迄今為止,,也只能將其制備?span style="color: rgb(0, 0, 0);font-size: 16px;caret-color: rgba(0, 0, 0, 0);letter-spacing: 0.54px;background-color: rgb(255, 255, 255);text-align: center;font-family: 宋體;">ClO2制劑的商品形式,需要應用時將其在現(xiàn)場發(fā)生后再使用,。



現(xiàn)在我國水產養(yǎng)殖用投入品市場上,,用作水產用消毒劑的ClO2制劑有很多,由于制售ClO2制劑的企業(yè),,可能是采用不同的配方制備的ClO2制劑,,因此,在我們利用從水產養(yǎng)殖用投入品市場上,,隨機采購的多種ClO2制劑完成的殺菌試驗結果證明,,市售各種ClO2制劑對水產動物致病菌的殺菌效果是存在巨大差異的。而本試驗結果證明了,,即使是同一種ClO2制劑,,配制時的濃度以及活化時間不同,配制而成的ClO2制劑溶液殺菌效果也是存在明顯差異的,。本試驗結果對ClO2制劑制售企業(yè)給予的提示,,ClO2制劑制售企業(yè)在向市場推出ClO2制劑之前,有必要完成ClO2制劑配制濃度,、活化時間與殺菌效果相關性試驗,,并且根據(jù)效果試驗結果,,在其產品說明書中詳細地寫出該產品的使用方法。


轉載聲明

本文版權屬于農財寶典(ncbd0000),,未經授權,,謝絕轉載。

作者:華中農業(yè)大學 陳昌福,;武漢科研時代生物技術有限公司 周鑫軍 王曉娟 陸珍珠

編輯:蔡丹燕微信號CDY9253,,新聞爆料、轉載授權請加微信)

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暨首屆全國高位池養(yǎng)蝦模式升級研討會


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地點:福建·漳浦



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主辦單位:

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承辦單位:

南方農村報社、農財寶典,、大國漁業(yè)


指導單位(擬):

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福建省水產技術推廣總站

海南省對蝦養(yǎng)殖協(xié)會

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2,、新形勢下金剛蝦產業(yè)模式創(chuàng)新與關鍵盈利點分析
3、金剛蝦育苗關鍵技術升級與病原檢測
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5,、斑節(jié)對蝦育種最新研究進展及推廣情況
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7,、中國金剛蝦消費結構的變化以及未來走勢
8,、金剛蝦產業(yè)思想?yún)R:未來五年,金剛蝦產業(yè)轉型升級之路
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1,、2022 中國金剛蝦產業(yè)鏈高端品牌風云榜

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