我院易干軍研究員領(lǐng)銜的香蕉遺傳改良團(tuán)隊(duì)與廣西大學(xué)陳玲玲教授團(tuán)隊(duì)合作,,組裝了三倍體香蕉種(AAB)兩個(gè)栽培類型Plantain和Silk的單倍型基因組,。同時(shí)對(duì)這兩個(gè)AAB品種的起源進(jìn)化進(jìn)行了深入分析,,分析了亞基因組不對(duì)稱進(jìn)化。這是國(guó)際上首次報(bào)導(dǎo)的異源三倍體染色體基因組,,該研究以“Two haplotype-resolved genome assemblies for AAB allotriploid bananas provide insights into banana subgenome asymmetric evolution and Fusarium wilt control”為題近日發(fā)表于Cell旗下植物學(xué)頂刊《Plant Communications》。這是繼9月初雙方合作的TT基因組后,,又一次在香蕉基因組研究上發(fā)表的重要成果,。 香蕉(Musa spp.)是世界上最大的草本植物,大多數(shù)栽培香蕉是通過M. acuminata(AA)和M. balbisiana(BB)的種內(nèi)或種間雜交而產(chǎn)生的,,因此香蕉基因組類型豐富多樣,,主要有AAA、AAB和ABB類型,。根據(jù)不同的食用方法,,香蕉可分為鮮食蕉(dessert banana)和主食蕉(cooking banana)。香牙蕉(Cavendish)和Plantain兩者是鮮食和主食的代表品種類型,。美食蕉是Plantain類型,,其具有高抗枯萎病、高類胡蘿卜素含量,、淀粉降解慢等特點(diǎn),。Silk也是AAB類型,我國(guó)稱為“龍牙蕉”( 代表品種是“過山香”),,也是印度和東南亞國(guó)家最受歡迎的品種之一,,但其高感枯萎病、類胡蘿卜素含量極低,。本研究以團(tuán)隊(duì)新選育的“美食蕉1號(hào)”和Silk品種為對(duì)象,,采用PacBio HiFi, CLR, ONT ultralong和Hi-C測(cè)序, 完成了其單倍型基因組的組裝解析(圖1),并對(duì)其進(jìn)行了深入分析,,為闡明香蕉遺傳多樣性奠定了基礎(chǔ),。 圖1. Plantain和Silk的基因組特征 了解種間基因的滲入模式有助于揭示栽培香蕉起源,研究團(tuán)隊(duì)通過分析基因組來源,,首次精確闡明了Plantain和Silk的祖先貢獻(xiàn)(圖2),。對(duì)于Plantain,M. acuminata ssp. banksii貢獻(xiàn)85.54%,,M. acuminata ssp. malaccensis貢獻(xiàn)5.07%,,M. acuminata ssp. zebrina貢獻(xiàn)3.11%,,M. schizocarpa貢獻(xiàn)4.06%,M. balbisiana貢獻(xiàn)0.36%,。對(duì)于Silk,,M. acuminata ssp. malaccensis貢獻(xiàn)59.86%,M. acuminata ssp. banksii貢獻(xiàn)29.22%,,M. acuminata ssp. zebrina貢獻(xiàn)9.55%,,M. schizocarpa貢獻(xiàn)1.06%。表明栽培香蕉的亞基因組A經(jīng)歷了極其復(fù)雜的雜交過程,,而亞基因組B是同質(zhì)的,。 圖2. 三倍體香蕉Plantain和Silk基因組的祖先品種貢獻(xiàn)分析 同源基因丟失是多倍體化后的常見現(xiàn)象,研究發(fā)現(xiàn)基因丟失區(qū)域與同源染色體交換 (homoeologous exchange, HE) 區(qū)域顯著重疊,,表明HEs后染色體片段丟失是基因丟失的重要原因,。進(jìn)一步分析亞基因組A1, A2, B之間差異表達(dá)等位基因 (DEAs),發(fā)現(xiàn)DEAs數(shù)目隨RNA樣本量呈對(duì)數(shù)線性增加,,樣本量達(dá)到35和23個(gè)時(shí)趨于穩(wěn)定,。共鑒定出52,338和49,388個(gè)DEA,DEA表現(xiàn)出比非差異表達(dá)等位基因(EEA)具有更高的Ka/Ks值,,表明DEA可能進(jìn)化速率更快,。另外,DEAs的啟動(dòng)子,、外顯子,、內(nèi)含子、5’-非翻譯區(qū)( UTR)和3’- UTR等區(qū)域比 EEAs具有更高的SNP密度 (圖3),。 圖3. 三倍體香蕉單倍型的亞基因組分化和表達(dá)分析 為了分析Plantain和Silk對(duì)Foc TR4抵抗力的差異,,研究團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了田間和盆栽實(shí)驗(yàn),Silk表現(xiàn)出典型的感染癥狀(葉子變黃和假莖分裂),,Plantain并沒有表現(xiàn)出明顯的感染跡象 (圖4),。侵染1周(1 wpi)后,Plantain上調(diào)基因數(shù)量(DEGs,,1,663)顯著高于Silk(DEGs,,901),KEGG富集顯示Plantain的DEGs在抗性途徑中高度富集,,Silk在與抗病性無關(guān)的代謝途徑中富集,,3wpi后Silk的DEG迅速增加??傮w而言,,Plantain 在 Foc TR4 感染的早期階段比 Silk 表現(xiàn)出更多的 DEGs。通過功能驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)一些新的轉(zhuǎn)錄因子可能通過強(qiáng)化細(xì)胞壁在植物防御中發(fā)揮重要作用,。 圖4. 三倍體香蕉Plantain和Silk對(duì)Foc TR4的抗性差異分析 香蕉富含類胡蘿卜素和淀粉,,這些物質(zhì)在不同品種的三倍體香蕉中含量差異較大,本研究結(jié)合基因組,、轉(zhuǎn)錄組和表型數(shù)據(jù)探討了Plantain 和Silk中造成差異的遺傳基礎(chǔ),,從而幫助改善香蕉的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。 本文第一單位為我院果樹所,,廣西大學(xué)陳玲玲教授,、宋佳明副教授和廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所盛鷗研究員,、易干軍研究員為論文共同通訊作者,,陳玲玲教授團(tuán)隊(duì)的博士研究生謝文召、鄭宇宇和果樹所何維弟博士為論文的共同第一作者,。香蕉遺傳改良團(tuán)隊(duì)的李春雨,、董濤、楊喬松,、胡春華,、畢方鋮、鄧貴明,、何維弟,、高慧君、竇同心和劉思文,,以及西南大學(xué)郭啟高和黨江波,,廣西大學(xué)蔡文國(guó)博士,華中農(nóng)業(yè)大學(xué)張建偉教授等人參與了本文的研究?jī)?nèi)容,。本研究得到了廣東省香蕉種業(yè)創(chuàng)新園項(xiàng)目(2022-NJS-00-001),、香蕉國(guó)家育種聯(lián)合攻關(guān)項(xiàng)目(2022-NPY-00-003)、國(guó)家香蕉產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-31-01)等多個(gè)項(xiàng)目的共同資助,。 解讀供稿:果樹所 盛鷗