夫妻一方染色體異常,，一方基因變異,，還有希望生出健康寶寶嗎,？近日,，在中山大學(xué)附屬第六醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心,，一名剛滿(mǎn)百日的男寶寶，在媽媽的懷中受到了眾人簇?fù)砗妥８,！?br>

該院專(zhuān)家團(tuán)隊(duì)創(chuàng)造性改良了針對(duì)環(huán)狀染色體的檢測(cè)方法,，應(yīng)用第三代試管嬰兒技術(shù)（PGT）阻斷遺傳缺陷，為這對(duì)年輕夫妻圓夢(mèng),。據(jù)文獻(xiàn)檢索,，這是國(guó)際上首個(gè)報(bào)道的“染色體脫環(huán)”成功案例。

中山六院生殖醫(yī)學(xué)中心專(zhuān)家團(tuán)隊(duì)。

環(huán)狀染色體異常不孕

小雪28歲,，她的丈夫29歲,，正是生育黃金年齡。結(jié)婚3年不孕,，求子心切的小雪夫婦踏上了漫漫求醫(yī)路,。2021年，在經(jīng)歷了三次人工授精失敗后,，經(jīng)進(jìn)一步基因檢測(cè),，小雪才發(fā)現(xiàn)，她的17號(hào)染色體形成了一個(gè)環(huán)狀,。這是一種很罕見(jiàn)的人類(lèi)染色體結(jié)構(gòu)畸變，攜帶者一般生育率較低,，出現(xiàn)不孕不育,，或反復(fù)流產(chǎn)、生育畸形兒等風(fēng)險(xiǎn)高,。夫妻倆經(jīng)過(guò)多方打聽(tīng),，來(lái)到廣州求醫(yī),。

17號(hào)染色其中一條體呈現(xiàn)環(huán)形,。

中山六院生殖醫(yī)學(xué)中心任姿副主任醫(yī)師接診后發(fā)現(xiàn)，小雪夫婦的情況比較棘手,。小雪身體和腿部均有牛奶咖啡斑,，并表現(xiàn)出輕微的語(yǔ)言發(fā)育障礙，與17號(hào)環(huán)狀染色體綜合征的表型吻合,。她的丈夫存在特殊面容并伴有輕度的智力障礙,，經(jīng)檢測(cè)確認(rèn)KMT2A基因異常。兩人想要生育一個(gè)健康的孩子非常困難,，子代染色體和基因均正常的理論概率極低,。

任姿副主任醫(yī)師介紹，目前借助三代試管嬰兒技術(shù)（胚胎植入前遺傳學(xué)檢測(cè),，PGT）,，在胚胎打孔取部分細(xì)胞做遺傳學(xué)檢測(cè)，從中選擇染色體正常,、不致病的胚胎去移植,，可有效避免特定的遺傳風(fēng)險(xiǎn)，實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育,。

三代試管嬰兒技術(shù)主要適用人群,。

人體有兩套遺傳物質(zhì),，一套來(lái)自父親，一套來(lái)自母親,。以往通過(guò)抽取夫妻雙方及其各自父母的血液進(jìn)行信息比對(duì),，可以明確染色體或基因變異遺傳自父母哪一方。通過(guò)對(duì)異常染色體/基因進(jìn)行標(biāo)注,，與夫妻的胚胎信息比對(duì),，就能知道胚胎是否遺傳了有問(wèn)題的遺傳物質(zhì)。

但經(jīng)過(guò)檢測(cè),，小雪的父母染色體均正常,，而她丈夫的父母也未有基因異常，夫妻兩人都是新發(fā)變異,，這就意味著難以借助常規(guī)技術(shù)進(jìn)行精準(zhǔn)的胚胎診斷,。

改良長(zhǎng)片段測(cè)序“建模”

饒是希望微弱,，小雪夫婦依然十分渴望擁有一個(gè)健康的孩子,。2022年2月,，他們開(kāi)始在中山六院正式接受輔助生殖技術(shù)助孕。

據(jù)了解,，單體型構(gòu)建（注）是做胚胎診斷最基本的步驟,，小雪夫婦無(wú)法通過(guò)雙方父母的信息比對(duì)“溯源”，只能另辟蹊徑,。經(jīng)過(guò)不斷探索,，生殖醫(yī)學(xué)中心團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了針對(duì)環(huán)狀染色體檢測(cè)的基于鏈讀測(cè)序的長(zhǎng)片段二代測(cè)序方法。

該院PGT檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室張志強(qiáng)主管技師解析道,，環(huán)狀染色體異常有兩種類(lèi)型,，一種是染色體的一頭一尾缺失，剩下的中間部分連接成一個(gè)環(huán)狀,，另一種是單純頭部跟尾部連成一個(gè)環(huán),。經(jīng)檢測(cè)，小雪屬于后者,，即末端端粒融合的類(lèi)型（注）,，由于沒(méi)有發(fā)生基因片頭的丟失，臨床癥狀相對(duì)輕,。

環(huán)狀染色體是形態(tài)學(xué)水平的測(cè)定,，要用到測(cè)序技術(shù)，類(lèi)似于拼積木的過(guò)程,，先把染色體的每一個(gè)小片段給測(cè)出來(lái),，再參照人類(lèi)基因組圖譜，把它拼成一個(gè)完整的染色體,。而依靠現(xiàn)有的基因組光學(xué)圖譜,、三代測(cè)序技術(shù)，效果都不太理想,，主要原因是未能檢測(cè)到大量能夠跨過(guò)環(huán)狀染色體端粒連接區(qū)域的片段,。

“理論上積木越大，拼接成功的概率就更高,，而且錯(cuò)誤率更低,。”張志強(qiáng)指出,，測(cè)序弧長(zhǎng)不足,，就沒(méi)法確認(rèn)染色體頭尾是如何連接的。通過(guò)改良的長(zhǎng)片段二代測(cè)序技術(shù),，檢測(cè)到了大量跨越端粒融合區(qū)域的長(zhǎng)片段DNA分子,，從而確認(rèn)了環(huán)狀染色體的結(jié)構(gòu)?！斑@樣就知道女方的兩條染色體當(dāng)中哪一條是線性的,，哪一條是環(huán)形的，將環(huán)狀染色體作為標(biāo)志物,，在胚胎上比對(duì),，就能明確胚胎是否有遺傳缺陷?！?/p>

測(cè)序讀長(zhǎng)越長(zhǎng),，拼接錯(cuò)誤的風(fēng)險(xiǎn)越低，診斷的準(zhǔn)確性和可信度更高,。  受訪者供圖

三代試管“挑”健康寶寶

借助同樣的方法,，團(tuán)隊(duì)也成功構(gòu)建了小雪丈夫致病基因的單體型。隨后,，對(duì)小雪夫婦送檢的11枚胚胎中,，挑選出了1枚染色體和基因均正常的胚胎。盡管異常概率高達(dá)90.9%,，但第一個(gè)周期就得到了健康胚胎,，令人鼓舞。

去年3月,，小雪順利接受胚胎植入,。孕4個(gè)月進(jìn)行羊水產(chǎn)前診斷，結(jié)果顯示胎兒染色體核型為“46,，XN”,，不攜帶環(huán)狀染色體，基因檢測(cè)顯示不攜帶KMT2A基因突變,。2023年12月7日,，小雪夫婦如愿迎來(lái)了一個(gè)健康的男寶寶，喜極而泣,。成功了,！生殖醫(yī)學(xué)中心與產(chǎn)科醫(yī)護(hù)團(tuán)隊(duì)擊掌相賀。

據(jù)悉,，這是國(guó)際首例順利誕生的“染色體脫環(huán)”寶寶,。經(jīng)文獻(xiàn)檢索，全球此前尚未有該類(lèi)環(huán)狀染色體單體型構(gòu)建成功的案例報(bào)道。目前,，寶寶相關(guān)評(píng)估及檢查均正常,。

該院生殖醫(yī)學(xué)中心主任方叢介紹，端粒融合型是染色體變異一個(gè)非常特殊的區(qū)域,，此項(xiàng)技術(shù)的突破不僅解決了這對(duì)夫婦雙遺傳風(fēng)險(xiǎn)的問(wèn)題,，還通過(guò)方法的改變大幅提高了檢查的便利性。僅需要夫妻雙方抽血就能完成異常染色體/基因突變的單體型構(gòu)建,，不需要做家系驗(yàn)證（注）,，且通過(guò)已建立的一體化PGT檢測(cè)技術(shù)，可同時(shí)完成胚胎植入前非整倍體檢測(cè),、單基因遺傳病檢測(cè),、染色體結(jié)構(gòu)變異檢測(cè)。除了檢測(cè)準(zhǔn)確度提高,，也滿(mǎn)足了更廣泛人群的需求,，例如家系不全（找不到雙親或不想讓雙親家屬得知自己在做試管嬰兒）、復(fù)雜染色體異常的疑難患者,，應(yīng)用前景廣闊,。

注：單體型構(gòu)建：采用遺傳學(xué)檢測(cè)方法，在致病基因突變位點(diǎn)的上下游范圍內(nèi)尋找與致病基因突變?cè)谕粭l染色體上的有效遺傳學(xué)標(biāo)記位點(diǎn),。利用遺傳標(biāo)記在家系中進(jìn)行分型,，尋找與致病基因連鎖的特異性遺傳標(biāo)記（相當(dāng)于參照物），在胚胎檢測(cè)時(shí)幫助判斷胚胎是否遺傳到了致病基因突變,。

端粒：是真核染色體兩臂末端由特定DNA重復(fù)序列構(gòu)成的結(jié)構(gòu),，使正常染色體端部間不發(fā)生融合，保證每條染色體的完整性,。

家系驗(yàn)證：患者或攜帶者通過(guò)基因檢測(cè),，明確致病基因、致病變異位點(diǎn)和致病性,。針對(duì)家族中其他成員進(jìn)行相應(yīng)變異位點(diǎn)的檢測(cè),，驗(yàn)證遺傳變異在家系中的共分離符合度，確認(rèn)致病基因及變異位點(diǎn)與疾病的關(guān)系,，確保后續(xù)胚胎檢測(cè)的可靠性,。

延伸

三代試管嬰兒技術(shù)是最優(yōu)選擇嗎？

有人會(huì)問(wèn),，第三代試管嬰兒技術(shù)能夠有效阻斷遺傳缺陷,，是不是就比二代強(qiáng)呢？對(duì)此,，中山六院生殖醫(yī)學(xué)中心專(zhuān)家團(tuán)隊(duì)作了解答,。

方叢主任介紹,，三代試管嬰兒技術(shù)主要針對(duì)有家族遺傳病風(fēng)險(xiǎn)的人群，一是有家族單基因病遺傳風(fēng)險(xiǎn),，常見(jiàn)的如地中海貧血,、脊肌萎縮癥、白化病,、苯丙酮尿癥,、血友病、遺傳性耳聾,、多囊腎等，一是有染色體異常遺傳風(fēng)險(xiǎn),。

該技術(shù)還適用于高齡女性,，以及一些反復(fù)自然流產(chǎn)、反復(fù)胚胎種植失敗的患者,。隨著生育年齡增加,，卵子染色體異常率增高，一般38歲以上助孕的女性,，也可以選擇三代試管嬰兒,，幫助生育健康的寶寶。

但是,，試管嬰兒技術(shù)并不是說(shuō)三代就比一代,、二代好。第一代試管嬰兒即傳統(tǒng)的體外射精-胚胎移植（IVF-ET）,，在實(shí)驗(yàn)室條件下讓精卵自然結(jié)合,，主要適用于女性因素導(dǎo)致的不孕。二代試管嬰兒是在顯微鏡下,，由胚胎師挑選活力好,、形態(tài)正常的精子一對(duì)一注射到卵母細(xì)胞，主要適用于男性因素導(dǎo)致的不育,。

“一般人群做普通試管就可以了,，正常胚胎是不建議做三代的。”方叢主任指出,，三代試管嬰兒主要針對(duì)特定人群,，因?yàn)閷?duì)胚胎有活檢的要求，在養(yǎng)到第5天需要取細(xì)胞檢測(cè),，在孕期還需要再次羊水診斷,，通過(guò)雙重把關(guān)，把遺傳風(fēng)險(xiǎn)降到最低,。由于技術(shù),、步驟不同，三代的費(fèi)用也會(huì)比一代、二代高,。

任姿副主任醫(yī)師表示,，日常門(mén)診的時(shí)候，經(jīng)常會(huì)碰到夫妻帶著有問(wèn)題的孩子來(lái),，準(zhǔn)備生二胎了才來(lái)做遺傳咨詢(xún),。從優(yōu)生優(yōu)育的角度，有遺傳病家族史的人群盡管沒(méi)有癥狀,，也要重視攜帶者篩查,，包括婚檢、孕檢,，必要時(shí)可以考慮借助三代試管嬰兒技術(shù)助孕,。例如兩廣高發(fā)的地貧，廣東的婚檢就有地貧篩查,，如果發(fā)現(xiàn)夫妻雙方是同型地貧攜帶者,，子代有3/4的遺傳風(fēng)險(xiǎn)，有機(jī)會(huì)通過(guò)三代試管干預(yù)生出健康寶寶,。

中山六院生殖醫(yī)學(xué)中心學(xué)科帶頭人梁曉燕教授特別提到,，女性隨著年齡增長(zhǎng)，生育力在不斷下降,。隨著三胎放開(kāi),，整體生育年齡后延，生殖醫(yī)學(xué)中心接診平均年齡幾乎每年增長(zhǎng)一歲,，去年是35.7歲,。高齡女性即使選擇三代試管嬰兒技術(shù)，胚胎移植成功后依然有一定的自然流產(chǎn)率,，需要承受的壓力更大,。提倡適齡婚育，女性最佳生育年齡為25-30歲,。

【記者】江玲

【通訊員】戴希安